循環腫瘤細胞 (CTC) 與循環腫瘤血管內皮細胞(CTEC)


實體腫瘤中的某些腫瘤細胞 (Tumor Cell, TC) 可侵潤血管 (主動性內滲),脫落并進入血液循環系統形成循環腫瘤細胞 (Circulating Tumor Cell, CTC)。其中,某些 CTC 可由血液帶至某一特定器官處后,粘附、侵潤并穿出血管 (主動性外滲),最終形成新的腫瘤轉移灶。腫瘤復發與腫瘤轉移有著類似的過程。腫瘤組織富含大量血管。與正常組織血管壁上的內皮細胞不同,腫瘤組織血管壁上的內皮細胞被稱為“腫瘤血管內皮細胞”(Tumor-derived Endothelial Cell, TEC) (Hida and Klagsbrun, 2005 Cancer Res 65:2507)。這些細胞脫落入血后形成“循環腫瘤血管內皮細胞”(Circulating TEC, CTEC) (Lin et al., 2017 Sci Rep 7:9789)。TC/CTCTEC/CTEC 均具有腫瘤的典型標志 - 染色體異倍體。CTC 與 CTEC 共同構成了一對“細胞型循環腫瘤生物標志物”,在腫瘤血管生成及腫瘤發生、進展、轉移、耐藥、復發等過程中相互協調,發揮著極為重要的作用。目前已證明,CD31- 腫瘤細胞在體內低氧的腫瘤微環境中或腫瘤細胞體外低氧培養條件下,可轉分化 (transdifferentiation) 成為 CD31+ 腫瘤血管內皮細胞 (Lin, 2020 Cells 9:1539)。



微信圖片_20201225092731


應用賽特 SE-i?FISH? 檢測 CTC 及 CTEC


賽特生物與美國 Cytelligen 公司密切合作,在世界上首次成功將差相富集 (SE) 與免疫熒光染色-染色體熒光原位雜交 (FISH) 整合為獨特的 SE-i·FISH 技術平臺。該技術擁有國內外 CTC 分離、鑒別的兩項國家發明專利 (ZL 2009 1 0137289.0,ZL 2011 1 0340544.9) ,可有效檢測腫瘤患者或腫瘤動物模型中的 CTC、循環腫瘤血管內皮細胞 CTEC 及其各種亞類細胞。SE-i·FISH 已被成功應用于以下多種 CTC CTEC 的相關臨床檢測。CTC 最近也已被納入美國 NCCN AJCC 腫瘤分期指南。


2020-01-04_171141


迄今為止,賽特生物團隊已與上百家國內外知名醫院、科研院所(如美國 UCLA、UCSD、Scripps、德國慕尼黑大學醫學中心、北京協和醫院、中國醫學科學院腫瘤醫院/中國國家癌癥中心、北京大學腫瘤中心、上海華山醫院、四川大學華西醫院等)及多家制藥公司密切合作,對近4萬例涵蓋各種實體腫瘤的大樣本上進行臨床驗證,在 CTC 的臨床應用(如腫瘤早診、療效快速評估、耐藥與復發的實時性監測等)及 CTC 單細胞研究等領域取得了豐碩成果,在《Clinical Cancer Research》、《Science Advances》等多個國際著名雜志上發表了多篇 SCI 高分論文。國際頂級期刊“科學”雜志已將獨特的賽特 SE-FISH 作為最具有代表性的 CTC 檢測技術向全球讀者進行了報道 (Science 2013, 341:415) 。由國家科技部、衛計委共同組建的腫瘤轉化醫療平臺,也將賽特生物的 SE-FISH 作為 CTC 的主要檢測技術向國內外廣大腫瘤界同行進行了推薦 (http://101.200.216.160:888/yyfw/285.jhtml。


差相富集技術 (Subtraction Enrichment, SE)


差相富集技術的主要作用原理是應用與白細胞相結合的免疫磁珠及特殊密度的非血源性細胞分離介質快速、高效地去除血液中絕大多數的白細胞、紅細胞及血漿蛋白,從而達到從人或腫瘤動物模型體液中有效富集非血源性腫瘤細胞的目的。


賽特免疫磁珠的高特異性:

由特殊工藝制備的 Cytelligen 賽特免疫磁珠偶聯了多種抗白細胞抗體以確保對白細胞的最佳去除效果。該免疫磁珠上的抗體僅與血源性白細胞相結合,而與非血源性腫瘤細胞無交叉反應。磁珠表面的特殊包被工藝確保了免疫磁珠與各種細胞不發生非特異性粘附。


15762072883277081

因富集過程不依賴腫瘤細胞表面標示物的表達,故可通用于所有不同實體腫瘤來源的 CTC 富集。富集過程中由于避免使用抗體直接抓取細胞及避免使用低滲溶破法去除紅細胞,所以富集后的腫瘤細胞維持了很好的自然狀態及很高的生物活性,適于后續原代腫瘤細胞培養及一系列各種形態學與功能性的相關研究。此外,SE 也可以有效富集分離各種大小不同的 CTC 、細胞團(癌栓,circulating tumor microemboli, CTM)。差相富集技術從技術層面解決了以往常見的 CTC 捕獲效率及捕獲豐度較低的問題,具有“非依賴、全亞型、高捕獲率、高活性”等特點。

       

各種 CTC 分離方法比較 


圖片2 


SE-i?FISH? 技術有效區分、鑒別“細胞型循環腫瘤標志物”CTC  CTEC


為了確保高靈敏、高特異性地有效檢測、分型各種 CTCCTEC,賽特生物將細胞內生物鏈三要素(核酸、蛋白及細胞形態)整體考量,開發出了 FISH 整合技術平臺,以同步、原位檢測細胞上的染色體核型、腫瘤標志物蛋白表型及細胞形態。 FISH 鑒別技術實現了對富集的 CTC 進行核酸水平和蛋白水平的同步、原位雙重鑒定,將免疫熒光染色與染色體熒光原位雜交 (FISH) 進行了有效整合,使得 CTC 計數、核型分析、表型分析、分子分型一步到位。


圖片4 

 

依據特定瘤標表達的有無、強弱及染色體的異常倍體特性,可以鑒別出具有不同臨床意義(如耐藥、腫瘤轉移與復發等)的各種 CTCCTEC 亞類細胞。從而為進一步探索 CTC、CTEC 及其亞類與腫瘤的預后、轉移、耐藥、復發等的相關性研究提供堅實的基礎與可靠的依據。大量臨床實驗證明,相對于傳統的細胞形態學檢查或目前常規的 CK 染色判斷 CTC,FISH 具有其它方法無可比擬的一系列特殊優勢。


SE-i?FISH? 的獨特技術優勢


(1)方法簡便、快捷、高效,適用于檢測各種生物體液樣本,如血液、胸水、腹水、骨髓、尿液、腦脊液、淋巴穿刺、宮頸涂片等
(2)不依賴于腫瘤細胞表面標示物的表達,可同步檢測所有實體上皮腫瘤各種 CTC、CTEC 及相應細胞團





微信圖片_20200327160230


(3)根據染色體不同倍體數目、腫瘤標志物蛋白表達及細胞大小,可對 CTC 及 CTEC 進行亞類分型,從而鎖定具有不同臨床意義(如腫瘤進展、轉移、耐藥、復發等)的不同亞類細胞
(4)富集的細胞維持了極高生物活性,適于后續原代細胞培養
(5)FISH 鑒別出的 CTC 及 CTEC 亞類細胞適于后續單細胞測序






微信圖片_20191216160631







1a

1b

1c

2

3

4

5

6

7

8

10

11

13

14

15b

15

15b

15c

15d

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

31

31B

32

33

34

35

36

37

  • 電話:(0523)8216-0035
  • 傳真:(0523)8216-0030
  • 郵箱:support@cytointelligen.com
  • 地址:江蘇泰州,中國醫藥城 G116 三樓,賽特生物醫藥科技有限公司,郵編 225300
  • 版權所有:賽特生物醫藥科技有限公司
  • 【免責聲明】
  • 岛国一区二区三区视频在线_欧美av无码专区_日韩无砖专区一中文字